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液體培養基如何接種☁•,你知道嗎↟│?
  • 釋出日期·│▩│↟:2022-10-28      瀏覽次數·│▩│↟:335
    •   液體培養基接種是用接種環▩·、移液器或吸管等工具☁•,將菌體或菌液移至試管▩·、三角瓶等容器中的液體培養基中的一種接種方法•↟₪✘◕。其操作與前面斜面接種基本相同☁•,但應注意·│▩│↟:液體培養基試管管口或三角瓶瓶口略向上以免培養液流出;加入菌體時☁•,應使接種環與管內壁輕輕研磨☁•,使菌體擦下☁•,塞好棉塞後☁•,將試管在手掌心中輕輕敲打或輕輕搖晃三角瓶☁•,使菌體混合均勻•↟₪✘◕。
        試管液體接種
        試管液體接種是將一定體積的樣品混懸液加入到盛有特定液體培養基的試管內☁•,或將一定體積▩·、按標準規定條件下培養過的培養液接入盛有特定液體培養基的試管內(有時是指接種環取一環☁•,或移液管移液器移取一定的體積☁•,例如0.1ml▩·、1ml等)•↟₪✘◕。涉及試管液體接種的操作有MPN法檢測大腸菌群/大腸桿菌☁•,以及沙門氏菌▩·、單增李斯特氏菌的二次增菌轉接操作等•↟₪✘◕。
        ①用酒精棉消毒操作檯面•↟₪✘◕。將移液器吸頭盒放入酒精燈右側☁•,靠近酒精燈放置•↟₪✘◕。將需要進行液體轉接的試管插在試管架上☁•,置於酒精燈左邊左手附近•↟₪✘◕。將移液器調至合適的刻度放於右手附近的架子上•↟₪✘◕。廢物缸放於右手能觸及的範圍內•↟₪✘◕。
        ②點燃酒精燈☁•,左手於酒精燈火焰附近開啟移液器吸頭盒☁•,右手持移液器用力插取吸頭兩下以防吸頭鬆動脫落☁•,拔出移液器並蓋上移液器吸頭盒盒蓋•↟₪✘◕。左手取待轉接液體試管☁•,試管底部位於左手手心☁•,移液器吸頭和試管口應在酒精燈火焰周圍的無菌區域之內•↟₪✘◕。
        ③將試管伸向右手•↟₪✘◕。右手食指☁•,中指☁•,無名指握住移液器☁•,拇指靠在移液器按鈕上☁•,小指和掌心下緣合圍夾住試管帽並用力拔出•↟₪✘◕。如果操作者的手比較小☁•,可以靠食指無名指和小指握住移液器☁•,拇指仍靠在液體按鈕上•↟₪✘◕。而中指向外伸☁•,靠中指內側和食指▩·、無名指外側夾住試管帽•↟₪✘◕。將試管口和移液器吸頭靠近火焰☁•,試管口灼燒一週☁•,在火焰附近將吸頭剛好伸入試管口☁•,抵住試管內壁下側☁•,同時按住移液器按鈕至一檔(輕微推不動)•↟₪✘◕。不要將移液器吸頭伸到試管底部☁•,而應傾斜試管使液麵傾斜至試管口附近並沒過吸頭頂端•↟₪✘◕。右手拇指緩慢鬆開☁•,使液體緩緩吸入洗頭☁•,注意不要吸入空氣•↟₪✘◕。如果有空氣吸入☁•,必須將液體壓回試管重新吸取•↟₪✘◕。當右手拇指鬆開時☁•,撤離移液器☁•,注意吸頭需儘量一直圍繞在在酒精燈火焰附近☁•,並且吸頭務必保持向下姿勢以防止液體倒流入移液器內部引起汙染•↟₪✘◕。
        ④吸完液體後☁•,將移液器撤離試管☁•,移液器吸頭移到酒精燈火焰的遠離操作者的一側☁•,將試管口在火焰上灼燒滅菌•↟₪✘◕。液體培養基
        ⑤滅菌後☁•,右手小指迅速將試管帽蓋上☁•,此時移液器吸頭仍然要在火焰形成的無菌區域內☁•,不可離酒精燈火焰太遠•↟₪✘◕。蓋上試管帽將試管歸位•↟₪✘◕。
        ⑥左手取待轉接入液體的試管☁•,右手保持移液器吸頭在酒精燈火焰附近•↟₪✘◕。
        ⑦右手保持握移液器姿勢取下試管帽並灼燒管口•↟₪✘◕。將吸頭抵靠在試管口的內壁上☁•,緩緩推動移液器按鈕至底(推至第二檔☁•,使殘存在吸頭頂端的液體也流出)•↟₪✘◕。推出液體時注意不要將吸頭深入試管底部☁•,也不要用力推導致液體飛濺•↟₪✘◕。
        ⑧左手將試管口靠近火焰滅菌☁•,移液器吸頭移到酒精燈火焰的另一側•↟₪✘◕。再次灼燒試管口
        ⑨右手保持握移液器姿勢將試管帽蓋上☁•,將試管歸位•↟₪✘◕。移取液體完畢後☁•,按壓移液器滑動杆使吸頭脫落至廢物缸☁•,移液器放回架子•↟₪✘◕。熄滅酒精燈☁•,將檯面消毒並收拾乾淨•↟₪✘◕。
        三角瓶液體接種
        相對於試管的液體接種培養☁•,三角瓶接種培養的優勢在於通氣效果好•↟₪✘◕。多見於黴菌或一些細菌的復壯培養或者搖床培養等•↟₪✘◕。操作與前面提到的液體試管接種操作基本相同☁•,最後將液體加入三角瓶的時候☁•,三角瓶傾斜☁•,移液器吸頭抵在三角瓶的內壁☁•,緩緩將液體加入☁•,避免噴濺和氣泡•↟₪✘◕。液體培養基
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